Soru

Zorluk: OrtaOksidatif Fosforilasyon ve Kemiozmotik Teori

İzole mitokondrilerle yapılan bir laboratuvar deneyinde, ortama bir inhibitör eklendiğinde oksijen tüketiminin tamamen durduğu gözlenmiştir. Daha sonra ortama bir ayırıcı (uncoupler) olan 2,42,4-dinitrofenol (DNPDNP) eklendiğinde, oksijen tüketiminin tekrar başladığı ve hızlandığı saptanmıştır. Bu gözleme dayanarak, başlangıçta eklenen inhibitörün aşağıdaki yapılardan hangisini etkilediği söylenebilir?

  1. A
    Kompleks IV (sitokrom oksidaz)
  2. B
    Kompleks III (sitokrom bc1bc_1 kompleksi)
  3. FoF1F_oF_1-ATP sentaz (FoF_o alt birimi)Cevap
  4. D
    Kompleks I (NADH dehidrogenaz)
  5. E
    Süksinat dehidrogenaz (Kompleks II)

Cevap

Başlangıçta eklenen inhibitör ATP sentaz kompleksini etkilemiştir; çünkü ayırıcı maddeler sadece 'eşleşmiş' durumdaki gradyan engelini aşabilir, zincirdeki doğrudan blokajları aşamaz.
Kemiozmotik teoriye göre, elektron transportu ile ATP sentezi birbirine 'eşleşmiş' (coupled) durumdadır. ATP sentaz (FoF1F_oF_1 kompleksi) inhibe edildiğinde (örneğin oligomisin ile), protonlar matrikse geri dönemez ve intermembran aralıkta birikerek ETZ'nin proton pompalamasını durduracak kadar yüksek bir elektrokimyasal potansiyel oluşturur. Bu durum oksijen tüketimini durdurur. Ortama bir ayırıcı madde (DNPDNP) eklendiğinde, bu madde zarın proton geçirgenliğini artırarak birikmiş protonların matrikse sızmasını sağlar. Bu durum gradyanı ('geri basıncı') ortadan kaldırdığı için ETZ tekrar çalışmaya başlar ve oksijen tüketimi hızlanır. Ancak doğrudan bir ETZ kompleksi (örneğin Kompleks IV) inhibe edilseydi, ayırıcı eklemek elektron akışını tekrar başlatamazdı.

Adım Adım Çözüm

1
Oksijen tüketiminin durma nedenini analiz etme
Oksijen tüketimi ya ETZ'nin doğrudan inhibisyonu (Kompleks I-IV) ya da ATP sentezinin durması sonucu oluşan aşırı proton gradyanı (geri basınç) nedeniyle durmuş olabilir.
Kemiozmotik teoride ETZ ve ATP sentezi birbirine sıkı sıkıya bağlıdır.
2
Ayırıcı (DNP) etkisini değerlendirme
DNP, protonların matrikse sızmasını sağlayarak proton-motif kuvveti (pmfpmf) sönümler.
Eğer durma nedeni yüksek proton gradyanı ise (ATP sentaz blokajı gibi), DNP bu gradyanı düşürerek ETZ'nin tekrar çalışmasına izin verir.
3
Sonucu inhibitör tipiyle eşleştirme
ETZ kompleks inhibitörleri (siyanür gibi) varlığında DNP etkisiz kalırken, ATP sentaz inhibitörleri (oligomisin gibi) varlığında DNP oksijen tüketimini tekrar başlatır.
Çünkü ayırıcılar zincirdeki bir engeli değil, sadece zarın protonlara karşı direncini aşarlar.

Anahtar Kavram

ETZ inhibitörleri ile oksidatif fosforilasyon inhibitörleri arasındaki farkın ayırıcı (uncoupler) maddeler kullanılarak ayırt edilmesi.

Daha Fazla Pratik

Termogenin (UCP-1) proteininin kahverengi yağ dokusundaki benzer mekanizmasını ve fizyolojik önemini inceleyebilirsiniz.
Tahmini Süre:1m 30s
Bu soruyu puanla