Protein saflaştırma tekniklerinden biri olan jel filtrasyon (boyut dışlama) kromatografisinde, bir protein karışımı kolona uygulandığında kolonu ilk terk eden (en önce elüsyona uğrayan) proteinlerin genel özelliği aşağıdakilerden hangisidir?
- Moleküler ağırlığı en büyük olan proteinlerAnswer
- BMoleküler ağırlığı en küçük olan proteinler
- CNet elektriksel yükü sıfır olan (izoizoelektrik noktadaki) proteinler
- DHidrofobik yan zincir içeriği en yüksek olan proteinler
- EOrtamdaki spesifik bir ligand ile en güçlü bağlanan proteinler
Answer
Jel filtrasyon kromatografisinde moleküler ağırlığı en büyük olan proteinler kolonu ilk terk eder.
Moleküler ağırlığı en büyük olan proteinlerin kolonu en önce terk etmesinin nedeni, bu moleküllerin kromatografi kolonundaki boncukların gözeneklerine (porlarına) sığmayacak kadar büyük olmasıdır. Bu durum 'dışlanma' (exclusion) olarak adlandırılır. Büyük moleküller gözeneklerin dışından dolanarak en kısa yolu takip eder ve kolonu en hızlı şekilde terk ederler.
Step-by-Step Solution
Key Concept
Jel filtrasyon (boyut dışlama) kromatografisinde elüzyon sırası moleküler ağırlık ile ters orantılıdır; en büyük olan en önce çıkar.
Hints
1
Jel filtrasyon yönteminde kolonun içinde mikroskobik gözenekleri (porları) olan boncuklar olduğunu hayal edin.
2
Hangi boyuttaki moleküller bu dar gözeneklerin içine sığamayarak boncukların arasından (dışından) akıp gider?
3
Gözeneklere girmeyen büyük moleküller 'kısa yolu' kullandıkları için kolonu her zaman en önce terk ederler.
Practice More
Jel filtrasyonun aksine, SDS-PAGE elektroforezinde moleküllerin ilerleme hızı ile büyüklükleri arasındaki ilişkiyi inceleyebilirsiniz.
Alternative Method
Jel filtrasyonu bir labirente benzetebilirsiniz: Küçükler labirentin her koridoruna girip kaybolurken (porlara girerken), çok büyükler labirente giremeyip çevresinden dolanarak çıkışa ulaşır.
Estimated Time:45s