Soru

Zorluk: OrtaMoleküler Genetik Teknikler

Klinik viroloji laboratuvarlarında, bir hastadan alınan tek bir solunum yolu sürüntüsü örneğinde İnfluenza, RSV ve SARS-CoV-2 gibi farklı virüslerin varlığını eş zamanlı olarak araştırmak amacıyla; reaksiyon karışımına her bir hedef gen bölgesi için özgül farklı primer çiftlerinin eklendiği PCR yöntemi aşağıdakilerden hangisidir?

  1. A
    Nested (iç içe) PCR
  2. Multiplex (çoklu) PCRCevap
  3. C
    Reverse Transcription PCR (RT-PCR)
  4. D
    In situ PCR

Cevap

Multiplex (çoklu) PCR, tek bir reaksiyon ortamında birden fazla primer seti kullanarak birden fazla hedef DNA dizisinin eş zamanlı olarak çoğaltılmasına olanak tanıyan yöntemdir.
Multiplex (çoklu) PCR tekniği, aynı reaksiyon karışımı içerisine her biri farklı bir hedef diziyi (örneğin farklı virüs tiplerini) tanıyan birden fazla primer setinin eklenmesiyle gerçekleştirilir. Bu sayede tek bir deneyde birden fazla patojenin veya genetik belirtecin varlığı eş zamanlı olarak test edilebilir; bu durum özellikle klinik tanı panellerinde (sendromik paneller) zaman ve maliyet tasarrufu sağlar.

Adım Adım Çözüm

1
Soruda verilen teknik gereksinimleri analiz edin.
Tek bir örnekten birden fazla hedefin (virüsün) aynı anda saptanması istenmektedir.
Bu durum, reaksiyon karışımına birden fazla bağımsız primer setinin eklenmesini gerektirir.
2
Tanımlanan 'birden fazla primer seti ile eş zamanlı çoğaltma' prensibini karşılayan tekniği belirleyin.
Bu prensip 'Multiplex PCR' tekniğinin temel tanımıdır.
Multiplex (çoklu) terimi, tek bir işlemde birden fazla sonucun (bantın/sinyalin) elde edilmesini ifade eder.

Anahtar Kavram

Multiplex PCR, sendromik panellerde olduğu gibi, aynı örnekte birden fazla genetik hedefin saptanması için her hedef için ayrı primer çiftlerinin kullanıldığı bir yöntemdir.
Bu soruyu puanla