Examkin

Soru

Zorluk: OrtaMoleküler Genetik Teknikler

Klinik bir laboratuvarda, RNARNA genomu taşıyan bir virüsün (örneğin İnfluenza veya SARS−CoV−2SARS-CoV-2) tanısını koymak amacıyla moleküler bir test planlanmaktadır. Standart PCRPCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu) yöntemi doğrudan DNADNA kalıbı gerektirdiği için, virüse ait RNARNA moleküllerinin amplifikasyon öncesinde bir DNADNA kopyasına dönüştürülmesi gerekmektedir.

Bu dönüşüm işlemini gerçekleştiren enzim ve kullanılan moleküler teknik aşağıdakilerin hangisinde doğru olarak verilmiştir?

  1. A
    DNADNA Polimeraz - Konvansiyonel PCRPCR
  2. B
    RNARNA Polimeraz - NorthernNorthern BlotBlot
  3. Ters Transkriptaz - RT−PCRRT-PCRCevap
  4. D
    DNADNA Ligaz - RFLPRFLP

Cevap

RNA genomunu DNA kopyasına dönüştüren enzim Ters Transkriptaz, kullanılan teknik ise RT-PCR (Reverse Transcription PCR) yöntemidir.
Ters Transkriptaz (Reverse Transcriptase) enzimi, bir RNARNA kalıbını kullanarak ona komplementer bir DNADNA (cDNAcDNA) zinciri sentezleme yeteneğine sahiptir. Bu işlem 'Ters Transkripsiyon' olarak adlandırılır. Oluşturulan cDNAcDNA daha sonra standart PCRPCR döngüleri ile çoğaltılabilir. Bu iki aşamalı tekniğin genel adı RT−PCRRT-PCR'dır ve RNARNA virüslerinin (HIV, HCV, Influenza, SARS-CoV-2 vb.) tanısında altın standarttır.

Adım Adım Çözüm

1
Kalıp molekülün ve hedefin belirlenmesi
Başlangıç materyali RNARNA, hedeflenen süreç amplifikasyon (PCRPCR) olduğu belirlendi.
PCRPCR sadece DNADNA kalıbı ile çalışabildiği için arada bir dönüşüm basamağı gereklidir.
2
Dönüşüm enziminin seçilmesi
RNARNA'dan DNADNA sentezleyebilen (RNA-bağımlı DNADNA polimeraz) Ters Transkriptaz enzimi seçildi.
Bu enzim, santral dogma akışının tersine çalışarak virüs RNARNA'sından komplementer DNADNA (cDNAcDNA) oluşturur.
3
Tekniğin isimlendirilmesi
Bu birleşik sürece RT−PCRRT-PCR denildiği saptandı.
Ters transkripsiyon basamağını takiben polimeraz zincir reaksiyonu yapıldığı için bu isim kullanılır.

Anahtar Kavram

Ters transkripsiyon süreci, RNA'nın DNA'ya çevrilmesini sağlayarak RNA virüslerinin PCR ile saptanmasına olanak tanır.
Bu soruyu puanla

Konular

Moleküler Genetik Teknikler

Bu konudan daha fazla soru